(1)制胶 用30%丙烯酰胺溶液－分离胶缓冲液－20%十二烷基硫酸钠溶液－10%过硫酸铵溶液（新鲜配制）-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液，灌入模具内至一定高度（剩余体积留作制备浓缩胶用），用水封顶，聚合完毕，倾去水层。再用30%丙烯酰胺溶液-浓缩胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液-四甲基乙二胺-水(0.8∶1.3∶0.025∶0.05∶0.005∶2.4)制成浓缩胶液，灌在分离胶上，插入样品梳（如为圆盘电泳，用水封顶），待浓缩胶液聚合后，小心除去样品梳或水。
(2)对照品和供试品溶液的制备 照各药品项下的规定。
(3)电泳 垂直板电泳：恒压电泳，初始电压为80V，进入分离胶时调至150～200V，当溴酚蓝迁移胶底处，停止电泳。
(4)用卡尺或用扫描定位法测量溴酚蓝指示剂和蛋白迁移距离（如为圆盘电泳还应测量染色前后胶条长度，垂直板电泳胶片厚度低于1mm，染色前后胶片长度基本不变）。计算相相对迁移率:分子量 以R'<[m]>为横坐标，标准蛋白的分子量对数为纵坐标，进行线性回归，由标准曲线求得供试品的分子量。
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