SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。
1.
分离胶(12%)
配制
所需试剂
所需体积
分离胶(12％)
30％丙烯酰胺
6.0
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
3.8
ml
10%SDS
150
μl
10%过硫酸铵
150
μl
TEMED
6
μl
蒸馏水
4.9
ml
2.
浓缩胶(5%)
配制
所需试剂
所需体积
浓缩胶(5％)
30％丙烯酰胺
1.3
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
1.0
ml
10%SDS
80
μl
10%过硫酸铵
80
μl
TEMED
8
μl
蒸馏水
5.5
ml
3.
分离胶缓冲液(pH8.9)
配制
所需试剂
所需体积
分离胶缓冲液
Tris
36.6
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸馏水
补足至100
ml
4.
浓缩胶缓冲液(pH6.7)
配制
所需试剂
所需体积
浓缩胶缓冲液（pH6.7）
Tris
5.98
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸馏水
补足至100
ml
5.
30%丙烯酰胺(pH≤7.0)
配制
所需试剂
所需体积
30%丙烯酰胺（pH≤7.0）
丙烯酰胺
29
g
甲叉-双丙烯酰胺
1
g
蒸馏水
补足至100
ml
6.
10%过硫酸铵(W/V)：1g过硫酸铵溶于10ml水中，4℃保存数周，尽量现用现配。
7.
10%SDS：将10
g
SDS溶于80ml重蒸水中并轻缓搅拌(室温低时需水浴加热溶解)，再定容至100ml，室温存放。
8.
样品缓冲液
配制
所需试剂
所需体积
样品缓冲液
1
M
Tris-HCl（pH6.7）
5
ml
SDS
2.5
g
巯基乙醇
1
ml
溴酚兰
0.05
g
蔗糖
10
g
蒸馏水
补足至100ml
9.
考马斯亮蓝染色液：0.25g考马斯亮蓝R-250用少量甲醇溶解后，用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀释至100ml。
10.
Tris-甘氨酸电泳缓冲液(pH8.3)
配制
所需试剂
所需体积
Tris-甘氨酸
电泳缓冲液（pH8.3）
Tris碱
15.1
g
甘氨酸
94
g
10％（W/V）SDS
50
ml
去离子水
补足至100
ml
凝胶配制所需试剂的母液不能放置太久，有条件的实验室可将母液保存在4度冰箱中，放置母液被微生物污染或者出现沉淀。
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