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丁型病毒性肝炎的辅助检查及诊断

2022.5.31
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  辅助检查

  丁型肝炎的特异性诊断方法为从肝脏和血清检测HDAg或HDV-RNA,或从血清检测抗-HD、抗-HDIgM,均做为诊 断的依据。

  1、HDAg

  用免疫酶法或放射免疫法检测血清HDAg,如为阳性,有助于早期诊断。慢性HDV感染时,由于血清中抗-HD滴度高,HDAg多以免疫复合物形成存在,须用免疫印迹法(WesternBlot)分离HDAg,方法较复杂。肝内HDAg可用免疫荧光法或免疫组化技术检测,可发现HDAg位于肝细胞核内或位于肝细胞浆中,有利于诊断。

  2、抗-HD、抗-HDIgM

  可用免疫酶联法或放射免疫法检测血清抗-HD,是诊断丁型肝炎常用的方法。于急性HDV感染的3~8周内,绝大多数均可检出抗-HD,可持续至恢复期,由于个例其抗-出现时间与程度不同,在急性感染时数周内须多次检测。抗-HDIgM出现较早,一般持续2~20周,用于早期诊断。高滴度抗HDIgM是诊断急性丁型肝炎的标志。当慢性HDV感染或HDV重叠感染时,抗-HD和抗-HDIgG是识别慢性丁型肝炎的主要标志。目前检测的抗-HDIgG是识别慢性丁型肝炎的主要标志。目前检测的抗-HD,实际以IgG型为主。

  3、HDV-RNA

  采用cDNA探针斑点杂交法检测;肝组织内HDV-RNA用原位杂交或转印杂交法检测。HDV-RNA用原位杂交或转印杂交法检测。HDV-HDV阳性是HDV复制和HDV感染的直接证据。检测血清HDV-RNA可用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR法)。

  总之,血清学检测,可检出部分HDV感染的患者,尚有相当一部分患者只有从肝组织检测HDAg才能确诊。

  诊断

  根据临床表现特征的诊断甚为不易,下述线索可资提示:①HDV流行区内HBsAg携带者发生的肝炎。②急性乙型肝炎出现双峰性血清ALT和胆红素浓度波动。③病情已趋稳定的非活动性病例突然出现肝炎活动,或慢性乙型肝炎病程中表现进行性恶化。④HBV复制指标本已降低或消失而临床表现反见恶化的病例。但是,确诊则决定于HDV血清学标志的检测。

  血清学诊断:HDV抗原、抗体可同时存在于血清。筛检中,常以抗-HD检测为第一步骤。抗-HD检测有放射免疫法(RIA)和酶吸附法(EIA)。

  抗-HDIgM在临床发病的急性早期便可出现,持续3~9周,于恢复期消失;倘若转为持续感染状态,则可持续阳性,且以7S型为主,而在病情反复活动时可有19S型出现。因此,可作为同时感染和重叠感染急性发病的鉴别。

  急性发病时,在抗-HDIgM滴度开始下降之后,抗-HDIgG滴度显示上升,但亦有限,并于2~18个月内消失。持续高滴度抗-HDIgG的存在是慢性持续性HDV感染的主要血清学标志。

  采用cRNA探针斑点杂交法或逆转录-多聚酶链反应检测HDVRNA为确定HDV感染的最敏感和直接的证据。

  病程早期即HDAg血症阶段用EIA法或RIA法可检测血清HDAg而有助于早期诊断。在慢性感染时,因血中持续存在高水平的抗-HD,HDAg多以免疫复合物的形式存在,须用免疫印迹法分离HDAg,可检测到HDAg-P24和HDAg-P27蛋白。

  组织学诊断:肝活检标本肝细胞核内HDV(HDAg或HDVRNA)组织染色为确诊手段。HbsAg阳性肝组织中HDAg检出率达9.6%,其感染率自当更高。酶抗体法(过氧化酶)或荧光抗体法均具特异性诊断价值,但阴性病例的血清申未必都查不出抗-HD。

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