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1,接种环需以无菌操作,载玻片要洁净无油迹,滴生理盐水和取菌不宜过多,涂片要涂抹均匀,不宜过厚;2,干燥是室温干燥;3,热固定温度不宜过高,以玻片背面不烫手为宜,否则会改变甚至破坏细胞形态;4,染色时滴加染液覆盖上菌体薄膜即可;5,染色过程中,不可使染液干涸。