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1.原则上，每次实验应该设有阳性和阴性对照。
2.取材部位 在水疱性皮肤病中，应尽量取最早期水疱损害，保持疱的完整性，或取初发的红斑性损害；在红斑狼疮中，取充分发展的皮损处组织；系统性红斑狼疮，亦可取未受累或避光处的皮肤组织，如果为阳性则更有诊断和鉴别诊断价值。
3.标本应及时检查，并且应避光保存，否则荧光会淬灭。
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