1、定义：又称降落PCR.即选定一个温度范围，如50-35℃，每降1-2 ℃进行1-2个循环，然后在50度下进行15个循环。
2.原理：随着退火温度的降低，特异性逐步降低，但特异性条带在温度较高时已经扩增出来，其浓度远远超过非特异性条带，随着退火温度的降低，特异性条带优先被扩增。
3.选择初始复性温度的原则：起始复性温度应该比引物的Tm值高出5-10度，然后每个循环递减1-2度。
4.应用范围：
⑴low copy of targeted DNA; ⑵ RT-PCR using oligo-dT;
⑶ high degree degeneracy (or less specific) of the first set of primers.
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