关于琥珀密码子的基本介绍

　　琥珀密码子（amber codon）指mRNA的多核苷酸链中的终止密码子（UAG），它引起蛋白质翻译的中止。这个名字的由来是因为这个密码子是在大肠杆菌噬菌体T4的“琥珀型”突变种中发现的，T4突变种的发现者是德国人H.Bernstein，而Bernstein这个姓在德语中意为“琥珀”。当mRNA的一个编码某个氨基酸的密码子由于碱基的置换改变为终止密码子UAG时，则肽链合成提前终止，即为琥珀密码子突变，称之为琥珀突变。琥珀突变是三种终止密码突变之一。终止密码突变也可叫无义突变(nonsense mutation)。该突变一般是致死的。琥珀突变以符号am表示，如S基因的琥珀突变可写成Sam。

　　目的：构建带有琥珀突变的辅助病毒VCSM13N1，为建立选择感染性噬菌体(SIP)技术平台奠定基础。方法：选择辅助病毒VCSM13蛋白ⅢN1区的Q51作为靶位点，采用重叠延伸PCR方法对其进行定点突变，经酶切及序列分析进行确认；噬斑计数法检测该琥珀突变在允许和非允许菌株中的开、关效应；以HBsAg抗体作为模式体系来确定该突变子作为辅助病毒的可行性，并对其性能进行综合评价。结果：获得了琥珀突变子VCSM13N1，在允许菌株XL1-Blue中其滴度达到2.5×1011，与野生型VCSM13相似(4×1011)，而用非许可菌株HB2151进行噬斑计数时，滴度在106水平，降低了数万倍。来源于菌株HB2151的突变病毒感染XL1-Blue计数噬斑，其滴度最高为5×109，降低了50倍；以其在许可菌中制备HBsAg噬菌体抗体，可以得到与野生型相似的结果。结论：琥珀突变子VCSM13N1可以作为辅助病毒，而且在非允许菌株HB2151中有一定的关闭效应。