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致力于为分析测试行业奉献终身
可能原因
验证或解决办法
膜没有完全均匀湿透
使用100%甲醇浸膜5~10min
洗膜不充分
增加洗液体积和洗涤次数
阻断不充分
增加封闭液孵育时间，或者提高温度选择合适的封闭试剂（脱脂奶粉、酪蛋白等）
二抗浓度过高
降低二抗浓度
检测过程中膜干燥
保证充分的反应液，避免出现干膜现象
曝光过度
缩短曝光时间
抗体与阻断蛋白有交叉反应
检测抗体与阻断蛋白的交叉反应性，选择无交叉反应的封闭剂。洗涤液中加入Tween-20可减少交叉反应 [2]
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