超敏反应实验诊断的操作方法

　　1.皮肤试验

　　皮肤试验简称皮试，当试验抗原进入致敏者皮肤时，皮肤中结合有IgE的肥大细胞或致敏T细胞就会与试验抗原结合，引发即刻型或迟发型的皮肤超敏反应。

　　2.血清IgE检测

　　IgE和IgG4（以下只用IgE代表）是介导I型超敏反应的抗体，因此检测血清总IgE和特异性IgE对I型超敏反应的诊断和过敏原的确定很有价值。

　　（1）总IgE测定：正常情况下IgE约占Ig总量的0.002%，因此必须用高敏感的放射免疫测定法及酶联免疫测定法和化学发光法进行检测。

　　（2）特异性IgE测定：特异性IgE是指能与某种过敏原特异性结合的IgE，因此需要用纯化的变应原代替抗IgE进行检测，常用的方法是酶联免疫测定法以及免疫印迹法和放射过敏原吸附试验、ImmunoCAP过敏原检测系统等。

　　3.免疫复合物

　　免疫复合物在体内的存在方式有两种，一种是存在于血液中的循环免疫复合物，另一种是组织中固定的免疫复合物。

　　（1）循环免疫复合物的检测方法有物理法、补体法、抗Ig法、细胞法。

　　（2）组织中固定的免疫复合物检测方法是免疫组织化学技术。首先从适当病理部位取组织标本做冰冻切片，用荧光标记物的抗人IgG或抗人C3染色，在荧光显微镜下见到相应部位显示荧光为阳性反应。