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茚三酮显色法测定壳聚糖含量介绍

2022.11.15
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zhaoqisun

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壳聚糖是甲壳素的脱乙酰基衍生物,是一种分子量较大的碱性多糖。由于分子间和分子内强烈的氢键作用,壳聚糖在水及大多数溶剂中的溶解性较差,可溶于醋酸等无机酸的稀溶液中。壳聚糖及其衍生物具有较强的生物活性,具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂和增强免疫力等功能。壳聚糖还具有良好的生物降解性和生物相容性,被广泛应用于生物医学、环境科学、食品等领域。随着壳聚糖产品的大量开发及上市,对其进行含量测定也逐渐受到了重视。

有研究根据壳聚糖与茚三酮作用形成的复合物在570nm 处有特征吸收的特性,建立了利用分光光度法测定壳聚糖含量的方法。该测定方法的适宜条件为:在pH5. 5 的HAc-NaAc 缓冲体系中,当缓冲溶液用量为2. 00mL、茚三酮( 浓度为10. 00g/L ) 用量为1. 00mL、加热煮沸20min 时,显色效果最好。 

在0. 004~0. 04 g/L 浓度范围内,壳聚糖浓度与其吸光度值线性关系良好,所得标准曲线方程为:y = 23. 942x + 0. 1423,相关系数r2 =0. 9981。稳定性、重现性和回收率实验结果表明,该显色方法在2h 内稳定性良好,精密度可靠。 

实验中发现,壳聚糖与茚三酮作用显色后,除了在570nm 处有显著的紫外吸收外,在408nm 处也有一明显吸收,并且与壳聚糖的浓度具有较好的线性相关性。估计是由于显色过程中改变了壳聚糖结构所致,在今后的研究中可予以关注。实验结果表明,利用茚三酮显色法测定壳聚糖含量的实验方法操作简单,反应条件也比较容易控制,且重现性好,适用于样品中微量壳聚糖的检测。


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