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肝素的检测肝素

2022.12.22
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超级艾蛋木啊

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APTT
APTT依然是作为监测UFH的选择之一。它是非常简单,快速和便宜的项目。然而,却难以标准化。APTT检测需要整个凝血瀑布中的所有蛋白都是完整的,从而可以准确测量肝素水平。有狼疮抗凝物或抗磷脂综合症的病人通常都有APTT升高,他们就必须使用肝素试验来监测。除了不同凝血因子水平的因素,试剂和仪器会影响其对肝素的敏感性,导致在实验室之间结果最终会有多达四倍的差异。国际血栓与止血协会和标准化委员会(ISTH SSC)企图建立一个标准方法,类似PT实验中使用的ISI一样,给APTT试验建立一个纠正系数。但是由于磷脂,激活剂和仪器种类的多样化,这一工作只取得了一点进步。ISTH建议每个APTT的检测系统都应当采用推荐的方法,通过肝素抗Xa活性来进行定标并获得相应的APTT监测范围。
硫酸鱼精蛋白中和试验
该试验是基于UFH,一个高度负电荷的分子,被硫酸鱼精蛋白,一个正电荷的蛋白,中和的原理。配备不同浓度的硫酸鱼精蛋白加入血浆中,再加入凝血酶,测量凝固时间。将凝血酶凝固时间恢复至正常的硫酸鱼精蛋白浓度就被认为是肝素的浓度,这个过程仅仅用于UFH。
抗Xa活性检测
发色底物法检测肝素抗Xa活性的原理都是一样的:标本中的肝素与AT形成复合物,抑制过量添加的Xa因子。剩余的Xa因子活性的测量,通过其与特异的底物作用,释放出pNA来进行。这一反应与肝素浓度成反比。不同的只是反应孵育时间,稀释用的缓冲液,底物以及是否添加外源的AT。缓冲液中的硫酸葡聚糖可以降低PF4的影响。
一步法检测
一步法测量肝素使得检测更加简单,并缩短了时间。这种方法不添加外源性AT。
检测是基于竞争抑制原理。加入Xa到血浆中与底物混合,立即同时有2个反应:底物被Xa水解和Xa被肝素-AT复合物抑制。一旦反应达到平衡,底物中释放出的pNA与待测血浆中肝素浓度成反比。在这个检测中,没有添加外源性的AT,完全依赖病人血浆中的AT数量。这就代表了病人真实的肝素功能反应。病人AT水平在35%-130%之间,肝素浓度检测不会受到影响。


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