早期原发性肺部感染主要依据组织胞浆菌素皮试结合X线胸片检查播散性病例应依据真菌学检查及血清试验。
1.组织胞浆菌素皮试 1941年由van Permis最早应用数年后由Emmons标准化是本菌在天冬酰胺葡萄糖培养基上于25℃培养2～4个月的菌丝相滤液制成这与“OT”的培养基相似无致敏作用一般用1∶100或1∶1000稀释液当皮内注射48h后局部发生硬结达5mm时即认为阳性可与皮炎芽生菌及球孢子菌等产生交叉反应。
2.真菌学检查
(1)直接镜检：从痰中直接找本菌仍较困难KOH涂片常是阴性可取痰血离心后的白细胞层及活检胸骨穿刺材料等用于涂片一般涂片可先以甲醇固定10min再用姬姆萨染色菌体常位于巨噬细胞内直径约2～4µm常呈卵圆形在较小一端有出芽芽很细染色时可以脱落细胞周围有一圈未被染色的空晕为细胞壁菌体内有一个大的空泡尽管菌体常位于巨噬细胞或单核细胞内但由于吞噬细胞被破坏故亦可位于细胞外许多其他酵母菌异物人工污染寄生虫等可似本菌的酵母型应注意区别。
(2)真菌培养：原发性肺部感染的痰液最适于分离本菌取患者晨起漱口后的第一口痰以脓性或带血的痰为佳直接接种于血琼脂或沙堡琼脂上25℃培养培养物应仔细检查有时易被其他污染杂菌及白念珠菌所污染此时可用Smith及Goodman改良培养基——含氢氧化氨的酵母浸膏培养基它可抑制许多细菌酵母及腐生性真菌并能中和酵母菌所产生的酸。
其他病变材料如活检标本胸骨穿刺物等可种于血琼脂或沙堡琼脂上再以胶布封起置于塑料袋内以防培养基干涸培养6～12周当有菌丝时即应作鉴定在血琼脂上菌落最初呈球状脑形粉红至红棕色有时可转为白至淡棕色丝状菌落此时难与皮炎芽生菌及其他许多真菌相鉴别应靠其带棘刺的大分生孢子及转成酵母型来帮助鉴定本菌的双相型菌落主要表现在真菌型菌落中镜检有细长分隔的菌丝有少数直径2～3µm的圆形或梨形光滑的小分生孢子及直径8～15µm的圆形或梨形的厚壁有棘刺的齿轮状孢子位于菌丝两侧或孢子柄的顶端这对本菌有鉴定意义。
3.血清试验
(1)筛选试验：早期乳胶凝集试验常呈阳性免疫扩散法可帮助区别活动性或非活动性病变与乳胶凝集试验相似常在出现症状2～5周后呈阳性也可用荧光素 荧光素是具有光致荧光特性的染料。
(2)确诊试验及预后估计试验：补体结合试验要在其他试验阳性6周以上后才呈阳性滴度达1∶32即有意义但有时在活动性病变期1∶8或1∶16即有意义故应作梯度稀释一般说来补体结合试验加上皮内组织胞浆菌素试验对诊断及估计预后最有价值。
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