1、首先，打开ImageJ，并且导入要分析的条带。随后在Image-Type中选择8-bit。在Process-subtractbackground中设置rollingballradius=50pixel，记得勾选lightbackground哦。
2、其次，进行分析参数的设置。这里选择Analyze-SetMeasurements，然后按照图示勾选参数哦。继续将Analyze-SetScale中Unitoflength设置为pixel。
3、然后，点击Edit-Invert，选择合适的形状工具，来选中目标条带。点击Analyze-Measure或者用快捷键Ctrl+M，就可以获得该条带的IntDen值了。
4、最后，重复用工具框选择第二个/第三个条带并且Ctrl+M，就可以获得这三个条带的灰度值了，将结果导出到Excel或GraphPad来进行统计分析及作图。
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