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一抗的稀释浓度建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释,不是再做1:100-1:1000稀释,注意了。其实没有必要分装,一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装,建议原液分装或是10稀释后分装。原液分装。抗体孵育之前稀释。做WB的浓度不一定需要很高的。可以设置简单梯度1:200;1:500;1:1000。看结果再优化