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一抗的用量和样品中的目标分子含量相关,如果含量较高,就不需要用太多一抗,以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度(义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果),如果样品与厂家的不是一种细胞,可以尝试上下摸索一两个浓度梯度;二抗的用量,和你所在实验室常规的用量就可以,如果出现效果不理想的状态,二抗的作用可以通过阳性对照和阴性对照、以及其他人的使用效果看出来有没有问题。