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q pcr中一个反应做三个复孔是三个生物学重复是否正确

2023.4.04
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超级艾蛋木啊

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q pcr中一个反应做三个复孔是三个生物学重复是错误的。

相同体系,前期实验CT值正常,本次实验,所有基因扩增CT值皆偏大。这种情况下,需要排查RNA是否存在降解。如何判定RNA是否存在降解呢?可通过1%的琼脂糖凝胶电泳进行检测。

完整度好的RNA是有三条带的,以真核生物为例,三条带分别是28s/18s/5s,且28s条带的亮度是18s的两倍,5s最暗。如果RNA发生降解,会出现三条带的亮度发生变化,甚至不存在完整的三条带。如果28s几乎看不到了,整个泳道Smear严重,说明RNA的降解已经很严重了。


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