磷霉素氨丁三醇的检查方法

结晶性取本品少许,依法检查(通则0981)应符合规定酸度取本品1.0g,加水20m1溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为3.5~5.5有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.12g的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100m1量瓶中用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取3ml,置10m1量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀溶液(1)取磷霉素氨丁三醇0.3g,加水60l使润湿,置60℃烘箱中加热24小时,加流动相溶解并稀释至20ml,摇匀系统适用性溶液取磷霉素氨丁三醇0.6g,加溶液(1)溶解并稀释至5ml(此降解溶液中含杂质A,B,C)灵敏度溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含60μg的溶液。色谱条件用氨丙基硅烷键合硅胶为填充剂( ZorbaxNH24.6mm×250mm,5m或效能相当的色谱柱);以磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾10.89g,加水1000ml使溶解)为流动相;流速为每分钟1.0ml;以示差折光检测器测定,温度为35℃;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,磷霉素峰的保留时间约为9~12分钟,氨丁三醇(裂分峰)、杂质B、杂质C、杂质A的相对保留时间分别约为0.3、0.48、0.54、0.88,杂质A峰与磷霉素峰之间的分离度应符合要求,杂质C峰的高与杂质C峰和杂质B峰之间的谷高比应不小于1.5。灵敏度溶液色谱图中,磷霉素峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至磷霉素峰保留时间的2倍。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,除氨丁三醇(裂分峰)外,杂质A与杂质B峰面积均不得大于对照溶液主峰面积(0.3%);杂质C峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.33倍(0.1%);其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.33倍(0.1%);各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.67倍(0.5%),小于对照溶液主峰面积0.17倍的峰忽略不计残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第二法)测定。内标溶液取正丙醇约0.1g,置100m1量瓶中,加水至刻度,摇匀。供试品溶液取本品约0.5g,精密称定,置10m1量瓶中,精密加入内标溶液2ml,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封对照品溶液取甲醇约30mg无水乙醇约50mg与异丙醇50mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置10ml量瓶中,精密加入内标溶液2ml,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封。色谱条件以5%二苯基-95%甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;起始温度为40℃,维持10分钟,以每分钟20℃的速率升温至200℃,维持5分钟;检测器温度为250℃;进样口温度为210℃;顶空瓶平衡温度为85℃,平衡时间为30分钟。测定法取供试品溶液与对照品溶液,分别顶空进样,记录色谱图 限度按内标法以峰面积比值计算,甲醇、乙醇与异丙醇的残留量均应符合规定水分取本品适量,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过1.0%重金属取本品1.0g,依法检查(通则0821第一法)金属不得过百万分之十