乙酰螺旋霉素的鉴别和检查方法

鉴别

(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。供试品溶液取本品,加甲醇制成每1ml中约含5mg的溶液。标准品溶液取乙酰螺旋霉素标准品,加甲醇制成每1ml中约含5mg的溶液色谱条件采用薄层板(取硅胶G0.6g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液2.5ml,研磨成糊状,搅匀后,涂布在20cm×5cm玻璃板上,晾干后,置105℃活化30分钟),以甲苯甲醇9:1)为展开剂测定法吸取供试品溶液与标准品溶液各101,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,置碘蒸气中显色结果判定供试品溶液所显四个主斑点的位置和颜色应与标准品溶液四个主斑点的位置和颜色相同。(2)在乙酰螺旋霉素组分测定项下记录的色谱图中,供试品溶液四个主组分峰的保留时间应与乙酰螺旋霉素标准品溶液四个主组分峰的保留时间一致。以上(1)、(2)两项可选做一项

检查

干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过3.0%(通则0831)。乙酰螺旋霉素组分测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含lmg的溶液。标准品溶液取乙酰螺旋霉素标准品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈0.1mol/L醋酸铵溶液(60:40)(用醋酸调节pH值至7.2士0.1)为流动相;检测波长为232nm;进样体积10μl系统适用性要求标准品溶液色谱图应与标准图谱致测定法精密量取供试品溶液与标准品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,供试品溶液色谱图中乙酰螺旋霉素各组分的出峰顺序依次为:单乙酰螺旋霉素Ⅱ、单乙酰螺旋霉素Ⅲ、双乙酰螺旋霉素Ⅱ和双乙酰螺旋霉素Ⅲ。单、双乙酰螺旋霉素(Ⅱ十Ⅲ)的含量以供试品溶液色谱图中相应的峰面积按下式计算单乙酰螺旋霉素(Ⅱ+Ⅲ)含量%A单Ⅱ+A单A单Ⅱ十A单m+A双十A×100%双乙酰螺旋霉素(Ⅱ+Ⅲ)含量%A双Ⅱ+A双4单n+A单Ⅲ+A双+A×100%式中A单为单乙酰螺旋霉素Ⅱ的峰面积;A单■为单乙酰螺旋霉素Ⅲ的峰面积;A双为双乙酰螺旋霉素Ⅱ的峰面积;A双m为双乙酰螺旋霉素Ⅲ的峰面积乙酰螺旋霉素四个组分的总含量按外标法以峰面积按下式计算乙酰螺旋霉素四个组分总含量%=AWP×100AswT式中Ar为供试品溶液色谱图中乙酰螺旋霉素四个组分峰的总面积As为标准品溶液色谱图中乙酰螺旋霉素四个组分峰的总面积Wr为供试品的重量;Ws为标准品的重量;P为标准品四个组分的百分含量总和。限度含单、双乙酰螺旋霉素(Ⅱ十Ⅲ)均应不得少于35%;乙酰螺旋霉素四个组分的总含量应不得少于75%。