一、QPCR原理
“qpcr原理是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法；应用于对PCR进程进行实时检测。
检测方法：加尾法和颈环法
miRNA很短，用mRNA的反转录方法无法得到足以定量的cDNA。所以，miRNA的反转要求将miRNA序列进行延长，目前常用的序列延长反转录法包括茎环法和加尾法。
特色：
①RNA加尾和引物延伸法，样本用量少（1μg）且不需分离miRNA。
②采用通用反转录引物，一次反转录产物可用于上百个miRNA检测。
③检测通量高，可同时检测数十个miRNAs。
④不同末端成熟miRNA都能被加尾和反转录，保证定量准确性。
⑤配合QIAGEN试剂盒，保证实验可靠性；
⑥扩增产物特异性高，通过产物热解离曲线（融解曲线）判断。
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