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丙酮沉淀法具体怎么做

2023.9.21
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超级艾蛋木啊

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1、在4度下，1：1或相应比例向蛋白质中加入丙酮（一般用20%-50%的丙酮沉淀蛋白），在冰域中温和的搅拌10-15分钟；
2、低温10000g离心10分钟，除去上清液，用以沉淀体积的2倍体积的冷缓冲液悬浮。

丙酮沉淀应该注意的是：
1、此过程容易使蛋白质变性，所以有很多情况下复溶的时候会出现沉淀不溶的现象；
2、为了最小程度的避免蛋白变性，全部操作必须在冰域上进行，整个过程要操作迅速，缩短丙酮与蛋白的接触时间；
3、溶液中如果有高浓度盐，会影响沉淀，离子强度不能超过0.2M。

丙酮沉淀法
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