甲烯蓝脱色法
实验方法原理 |
琥珀酸脱氢酶能使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,并将脱下的氢交给受氢体。用甲烯蓝作受氢体时,甲烯蓝被氢还原生成无色的甲烯白。其反应如下: 琥珀酸+甲烯蓝→延胡索酸+甲烯白+蓝酸 丙二酸是琥珀酸脱氢酶竞争性抑制剂细菌量越多或脱氢酶活性越高甲烯蓝脱色所需时间越短,因此,甲烯蓝脱色所需时间的倒数可用来表示酶的活性或细菌生长的情况。 |
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实验材料 | 大肠杆菌 |
试剂、试剂盒 | 琥珀酸钠 甲烯蓝 磷酸 丙二酸溶液 液体石蜡 |
仪器、耗材 | 试管 吸量管 电热水浴锅 |
实验步骤 |
(一)琥珀酸脱氢酶活力检查 展开 |
注意事项 |
①第三管加入的菌液预先用沸水煮5 min作为对照管; |