方法
细胞接种和转染
HEK293细胞(80%融合度)用胰酶消化后分到96孔白板中，每孔15,000细胞。当细胞超过50% 融合度时，用NF- κB-RE
萤火虫荧光素酶和海肾对照组质粒对细胞进行共转染，其中使用三种不同比例FuGENE和DNA组合方式，转然后，细胞置于37°C培养箱中培养24h。
TNF-α诱导
将10 μg/mL TNF-α的溶液用细胞培养基稀释到20ng/ml制成诱导溶液。无添加培养基作为对照。操作时将原培养基移除后加入100μL对照或诱导溶液，之后将板放回培养箱继续孵育7小时。
图2 原始发光值数据。图中所示为不同转染条件下(转染试剂：DNA比值)TNF-α未诱导和诱导的RFU值。每个转染条件有9个重复。
图3 均一化发光值结果。用海肾发光值对萤火虫RLU做均一化。
细胞裂解液的制备
移除细胞培养基后孔中细胞用PBS洗两次。裂解缓冲液恢复至室温后每孔加入20μL。室温下温柔震荡15分钟促进细胞裂解。在板底安上一个白板密封盖以增强荧光信号强度。
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