试剂盒组成
组分 |
50次 |
100次 |
吸附柱和收集管 |
各50个 |
各100个 |
裂解液Ⅰ |
12 mL |
24mL |
裂解液Ⅱ |
12 mL |
24mL |
析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
洗涤液 |
9 mL |
18 mL |
洗脱液 |
6 mL |
12 mL |
消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
说明书 |
1份 |
1份 |
产品介绍
BIOG RNA Stool Kit是我公司研发团队专为从粪便中提取基因组RNA而设计,适用于不同来源的固态或液态粪便样本。BIOG RNA Stool Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。
操作步骤:
请自行准备:无水乙醇、PBS、1.5mL离心管。
取出析出液和洗涤液,按以下操作:
a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇;9mL加入51mL无水乙醇。
b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇。
c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
取200mg的粪便于试管中(若粪便样本为液态,取200μL于试管中),加入2mL PBS充分振荡混匀,300g离心5分钟,收集上清;取收集的上清液1mL于1.5mL离心管中,12000 rpm离心5分钟,弃上清后沉淀用1mL PBS重悬,振荡混匀后,12000 rpm离心5分钟,收集沉淀。
加入200μL裂解液Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置30分钟。
加入200 μL 裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
加入600μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。
将吸附柱放入收集管内,取上述溶液600μL转入吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。
将剩余400μL液体转入上述吸附柱内,重复操作步骤7。
将吸附柱放回收集管内,加500μL洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。
将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 分钟,离去残留的洗涤液。
取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-100 μL洗脱液,静置3分钟,12,000 rpm 4℃ 离心2分钟,收集RNA溶液。提取的RNA-70℃保存,或直接用于下一步实验。
注意事项:
1、析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立
即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
2、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。
储存、运输和有效期
本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月,消化液请于-20℃存放,避免反复冻融,裂解液Ⅰ请于4℃存放。
质量控制
本产品经严格的质量检验证明,无生物污染
注意 本产品仅用于科研