用于检测和定量分析极性细胞代谢物的一种新颖...（三）

2. 使用UPLC／Xevo-TQ联用仪器对HILIC LC-MS方法开发标准品和细胞萃取物进行定量分析

在UPLC优化过程中进行的标准品分析表明使用酸性pH的流动相缓冲液可提高对氨基酸和有机酸的分辨率、信噪比和峰对称性。图3比较了对一种包含约2µg/mL L-赖氨酸的纯氨基酸溶液所得出的两幅MRM色谱图。靠上的色谱图通过使用碱性流动相（液相色谱条件1）所进行的分离而得出，而靠下的色谱图则采用酸性流动相（液相色谱条件2）。

图3. 比较不同pH下，包含约2µg/mL L-赖氨酸溶液的两幅MRM色谱图

图4. 液相色谱条件（2）得出的MRM色谱图示例

图4将酸性流动相（液相色谱条件（2））下1600ng/mL校准标准品（上图）和样本H-S（0090）的MRM色谱图进行了叠加。

在此条件下，我们成功分离并定量分析了28种化合物，其中包括氨基酸、有机酸和磷酸盐（图6）。

图5. TargetLynx给出的ADP电子报告示例

43种化合物的定量分析（既包括酸性也包括碱性条件）使用TargetLynx^TM进行。对于每种化合物，均生成了相应的电子报告；计算结果通过线性回归进行确定。图5是腺苷二磷酸（ADP，在三羧酸循环中特别重要）的一个报告示例。