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调整有机相比例，看看变化趋势，如果能调开，用这个方法简单变梯度，这个最好是有经验的实验员调整调的好的话，峰型会变得很好。调整水相pH值，这个吧，如果你分不开的色谱峰是有酸碱性的官能团会比较好。不过pH值一变，所有色谱峰的保留时间都可能变色谱柱，你看看峰型，有没有拖尾。如果有的话换一根好点儿的柱子可能就分开了。如果峰型还好就不用折腾了。另外实在分不开，可以考虑换柱子填料。比如C18，可以换C8或者苯基柱
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