妥布霉素地塞米松眼膏的含量测定方法

妥布霉素精密称取本品适量(约相当于妥布霉素1mg),置分液漏斗中,加乙醚50m1,缓缓振摇,使基质溶解,用水提取5次,每次15ml,合并提取液,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度。照抗生素微生物检定法(通则1201)测定。可信限率不得大于7%。1000妥布霉素单位相当于1mg的C8H37N5O3地塞米松照高效液相色谱法(通则0512)测定。溶剂甲醇溶液(3→4)。

供试品溶液取本品适量,精密称定(约相当于地塞米松3mg),置分液漏斗中,加正己烷50ml,缓缓振摇,使基质溶解用溶剂提取3次,每次15ml,合并提取液,置50m1量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取地塞米松对照品约20mg,精密称定,置l00ml量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取15ml,置分液漏斗中,加正已烷50ml,用溶剂提取2次,每次15ml,合并提取液,置50m1量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。

系统适用性溶液取地塞米松与倍他米松对照品各适量,加甲醇适量使溶解,用溶剂稀释制成每1ml中各约含0.03mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈水(28:72)为流动相;检测波长为240nm;进样体积20pl系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序依次为倍他米松峰与地塞米松峰,倍他米松峰与地塞米松峰间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中地塞米松(C22H23FO5)的含量。