色谱柱用久后会出现柱压升高,柱效降低,峰形畸变, 保留时间改变等变化,如不采取适当措施,色谱柱将无法再使用。因此选择合适措施延长柱子的使用寿命就显得至关重要了。
正确使用试剂和样品
样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,造成柱压升高,导致色谱峰型拖尾、变宽,引起柱效下降。
Ø 有机溶剂使用色谱纯规格,水使用超纯水。
Ø 样品配置完后使用滤膜过滤。
Ø 正确使用缓冲盐:使用前要抽滤,使用后须冲洗。
备注:
Ø 由进样端筛板被堵引起的柱压升高,可用20%甲醇反向冲洗色谱柱(注意此时不应接检测器)。
Ø 缓冲盐析出的补救方法:
ü 方案1:用20%甲醇以1.0ml/min流速35℃条件下冲洗色谱柱。
ü 方案2:用20%甲醇以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。
加装“保护柱”
“保护柱”即很短的色谱柱,填装和所用填料均与液相色谱柱相同。 “保护柱”可以阻拦一些微小不溶物。从而达到延长柱子寿命的效果。
备注:
在使用UPLC时,建议使用微孔过滤片来代替“保护柱”以阻挡颗粒物进入柱中。
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