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高效液相色谱系统操作注意事项---流动相脱气

通微
2020.7.22

一、流动相脱气的必要性

流动相中溶解的气体在管路中会由于压力的变化产生气泡,加上气体的可压缩性比液体大的多,所以当输液系统管路存在气泡时,会导致一系列的现象发生,如:

1

气泡的不断产生会降低泵的可靠性、引起基线波动、噪声增加;

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小气泡的存在会导致化合物峰的保留时间漂移;

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大气泡的存在会直接导致液相色谱系统压力下降甚至降为0,同时流速也会下降甚至泵不出液;

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通过色谱柱的气泡进入到检测器后,会引起信号的波动,表现为色谱图上出现不规律的毛刺峰;

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5

其他一些无法预测的问题。

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二、气泡的来源

绝大多数情况下,气泡来源于流动相中溶解的气体(氧气或空气)。当然一些其他情况也会导致气泡的产生,比如:低压梯度在线混合不同流动相产生气泡、进样时引入气泡、液路受阻或流动相跑完等产生气泡。

三、气泡的消除(流动相脱气)

气泡的存在严重影响液相色谱系统分析结果的准确性,因此实验前有必要进行脱气,尤其是流动相的脱气。流动相脱气的方法有多种,如采用惰性气体脱气、加热回流脱气、抽真空脱气、超声脱气以及在线脱气机脱气等。其中,综合考虑操作的便利性和脱气效率等因素,超声脱气和在线脱气机脱气的应用较为广泛。

 超声脱气:

超声脱气的脱气效率不是很高,大概30%左右。但由于其操作的便利性,也被广泛应用于高压梯度液相色谱分析的脱气手段。超声脱气的方法一般是将流动相置于超声清洗器中,超声10~15 min左右。

 在线脱气机脱气法:

在线脱气机脱气效率高,可连续在线脱气,多用于低压梯度混合液相色谱分析的脱气手段(低压梯度混合较高压梯度混合更容易产生气泡),但因在线脱气需要在线脱气机,所以需要在输液系统中另外配置脱气机模块,所以脱气的成本也相应提高。

上海通微分析技术有限公司新发布的一款液相色谱系统,EasySep®3030高效液相色谱系统,在高压梯度混合的基础之上,可根据用户需要配置多通道在线脱气机,可同时实现对输液泵和自动进样器模块的在线脱气,大大提升定性定量的数据重复性。

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