基因治疗药物是通过质粒或病毒载体将遗传物质转移到患者体内细胞中，在体内进行蛋白质表达并发挥治疗效果。自新冠肺炎疫情爆发以来，各国科研机构和制药公司都在积极研发新冠病毒治疗药物和疫苗。在研发这些新型治疗药物时，有些会利用到病毒载体（病毒样颗粒; 包括VLP），而病毒载体的分析和分离纯化常常会使用色谱层析法。
本篇推送列举了东曹TSKgel色谱柱和Toyopearl层析填料在病毒载体分离纯化中的应用实例和相关文献，供大家参考。
01
病毒载体的色谱分离模式
病毒载体纯化通常有以下几种色谱分离模式。SEC是根据颗粒大小将病毒从DNA、杂蛋白中分离出来。IEC是基于病毒颗粒所携带的蛋白质电荷差异实现分离。AFC利用基质偶联受体或配体与病毒之间的特异性亲和作用。
● 使用阴离子交换色谱分析病毒载体
在纯化病毒载体时，除了需要去除混入的DNA、蛋白质杂质外，病毒颗粒中还含有目标基因的实心颗粒 (Full颗粒) 以及不含基因的空心颗粒 (Empty颗粒)。为了提高载体的效率，仅需要纯化Full颗粒。
下图是使用阴离子交换色谱柱TSKgel DNA-STAT分离AAV的Full颗粒和Empty颗粒的色谱图。图中Peak 2的区域中含有较多的Full颗粒。所有病毒颗粒中含目标基因颗粒的比例 (VG/CP) 从样品分离纯化前的21.0%提高至Peak 2区域中的73.1%。
02
病毒载体的纯化工艺步骤示例
Ref.: M. Fuerstenau et al., BioProcess International, 15 (2017) 7, data modified
03
TSKgel色谱柱分析病毒载体的实例
04
Toyopearl填料纯化病毒载体的实例
以上文献我们都提供了链接供大家查阅，
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