(图片来源:包图网)
在采用液相色谱进行测定时,一个组份,可能可以通过多个不同的模式来达到理想的分离效果。这使我们在实际应用中,可以有更多的选择空间,可以根据不同样品的不同情况与需求,选择更合适的测定方法。
下面我们就以柠檬酸为例,分别尝试“反相色谱模式”、“离子交换模式”、“亲水模式”三种不同分离模式的效果。
柠檬酸(Citric Acid,简称CA)是一种重要的有机酸,又名枸橼酸,分子式C6H8O7,易溶于水。
反相色谱模式
色谱柱:月旭有机酸分析专用柱,Ultimate®OAA(4.6×300mm)。
流动相:磷酸盐缓冲溶液与甲醇进行梯度洗脱;
检测波长:210nm;
柱温:30℃;
流速:0.5mL/min。
保留时间
峰面积
峰高
塔板数
不对称度
分离度
22.35
28.96
85.67
27559
1.41
n.a
离子交换模式
色谱柱:月旭氢型强阳离子交换色谱柱,Xtimate®Sugar-H(7.8×300mm,5μm)。
流动相:0.008mol/L硫酸溶液;
检测波长:210nm;
柱温:30℃;
流速:0.6mL/min。
保留时间
峰面积
峰高
塔板数
不对称度
分离度
8.08
118.53
722.75
17706
1.36
n.a
亲水模式
色谱柱:月旭两性离子键合硅胶HILIC柱,Ultimate®Amphion-Ⅱ(4.6×150mm,5μm)。
流动相:0.1mol/L乙酸铵溶液/乙腈=7/3;
检测波长:210nm;
柱温:30℃;
流速:1.0mL/min。
保留时间面积高度
面积%
理论
塔板数
拖尾因子
13.57
4825192
170496
100.00
6712
0.98
结论
使用月旭Ultimate®OAA(4.6×300mm)、Xtimate®Sugar-H(7.8×300mm,5μm),Ultimate®Amphion-Ⅱ(4.6×150mm,5μm)三款色谱柱,分别在相应的色谱条件下检测,均能满足检测需求。在日常检测或方法开发中,可根据其他待测成分的性质,选择合适的分离模式来检测。
作者:小吴
排版:蔡根花
审核:夏微微
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