正确的样品制备技术是获得高质量数据的关键。(U)HPLC、LC-MS作为制药、食品、环境、科研以及临床检测中常用的分析方法,样品上机前的过滤是必备的前处理技术,不仅能有效去除样品中的颗粒,还可延长色谱柱寿命,减少仪器的停机时间。
然而看似一样的滤器、一样的操作,得到的结果却截然不同,其中一个重要的原因便是滤膜的截留率,即样品中颗粒的去除率或进入仪器中的颗粒百分比。
实验证明,即使相同的滤膜和孔径,也可能导致完全不同的截留率。
下面就让我们来看几个例子。
样品过滤截留率对比
下方两个实验检测了不同材质、不同孔径的针式滤器对0.05% (v/v) 微珠溶液的截留率。
( 左右滑动下方表格以显示全部信息 )
由于低的滤膜截留率无法有效去除颗粒,因此导致(U)HPLC或LC-MS系统压力报警停机,色谱柱寿命下降。
图1:样品经不同材质、孔径的滤器过滤后,系统压力随进样次数的变化
流动相过滤截留率对比
除了样品的过滤,流动相中颗粒的存在也会在(U)HPLC或LC-MS中引起严重的问题,研究表明,流动相中颗粒的不完全去除也会导致系统背压的增加。
图2:流动相经不同材质、孔径的滤膜过滤后,UHPLC背压随时间的变化
由上述实验可知,虽然滤膜的物理尺寸可以起到去除颗粒的目的,但在实际操作中也会出现比滤膜孔径大的颗粒通过了滤膜,或者孔径小的颗粒反而没通过的现象,这主要是由滤膜孔的形状、大小、分布和对称性等综合因素造成的。因此,为确保真正有效的过滤,得到高质量的数据,您需要更可靠的过滤产品。
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