液相色谱‑串联质谱技术（LC-MS/MS）在检验医学领域正在快速应用与发展。此技术结合了色谱的高分离能力和质谱对物质的靶向定量能力，具备了高灵敏度、高特异性、高通量、多指标同时分析的能力，已经成为检测小分子代谢物的金标准方法。近期发表于《中华检验医学杂志》和《协和医学杂志》多篇重量级LC-MS/MS临床应用文章对LC-MS/MS的技术优势、临床应用及面临的挑战进行了详细介绍，同时也为如何用好LC-MS/MS技术这把检测“利刃”提出相应建议。
LC-MS/MS在肾上腺偶发瘤临床诊疗中的应用
在肾上腺偶发瘤临床诊疗过程中仅依靠临床问诊或体格检查难以对患者的激素水平进行准确评估，而既往免疫法对激素的检测存在较强的交叉干扰、灵敏度不足的缺陷。基于LC-MS/MS的技术优势，使其在类固醇激素的精准检测中发挥了重要作用。
库欣综合征
自主性皮质醇分泌过量导致的库欣综合征在肾上腺偶发瘤内分泌功能紊乱中最为常见，临床一般通过24h尿游离皮质醇、午夜唾液皮质醇、地塞米松抑制试验等项目来辅助库欣综合征的诊断。24h尿游离皮质醇可准确反映具备生理学活性的皮质醇水平。由于人体皮质醇存在昼夜节律的变化，午夜皮质醇水平降至最低，库欣综合征患者的皮质醇节律消失。同时测定血清皮质醇和地塞米松水平可有助于地塞米松抑制试验的结果准确，从而更准确判读患者是否为库欣综合征患者。
原发性醛固酮增多症
原发性醛固酮增多症在继发性高血压中占比5-10%，伴有高血压或不明原因低钾血症的患者都应进行原发性醛固酮增多症的筛查。通过醛固酮-肾素比值来辅助原发性醛固酮增多症的诊断。醛固酮在体内水平极低（pg/mL），相较于与免疫学方法，通过固液萃取等样本前处理的LC-MS/MS法可对其更为有效且精准的检测。通过LC-MS/MS技术检测血管紧张素I来进行肾素评估，可避免早期放射酶免法和化学发光法检测肾素活性和肾素浓度存在的问题。
肾上腺皮质癌或先天性肾上腺增生
肾上腺偶发瘤在极少数情况下可能为肾上腺皮质癌或先天性肾上腺增生。40-60%的肾上腺皮质癌存在激素分泌过量。而肾上腺皮质类固醇合成相关酶的缺陷所导致的先天性肾上腺皮质增生也会出现相关类固醇激素的异常。通过性激素的检测可用于肾上腺皮质癌的辅助判读，LC-MS/MS法在性激素的检测中具有独特优势，可避免免疫分析方法在特殊人群性激素检测准确度的问题。先天性肾上腺增生依据肾上腺皮质类固醇合成相关酶的缺陷不同分为多种亚型，不同亚型类固醇激素的变化不同。LC-MS/MS法可同时对多种类固醇激素精准检测，为先天性肾上腺增生的诊断及分型提供帮助。
嗜铬细胞瘤
嗜铬细胞瘤也属于肾上腺意外瘤的一种，也应该对嗜铬细胞瘤进行筛查，避免漏诊。通过对肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺及其代谢物的检测有助于嗜铬细胞瘤的辅助诊断。在众多的儿茶酚胺及其代谢物中，甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素特异性及灵敏度更优，也是指南嗜铬细胞瘤筛查的首选检测指标。LC-MS/MS法也被指南确定为甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素检测的首选方法。
LC-MS/MS在罕见病临床诊断中的应用
罕见病具有种类多、发病率低、诊治困难等特点，实验室常规检测方法或检测项目在罕见病诊治上存在局限性。LC-MS/MS技术以其特异度高、可同时区分/定量多种代谢物等特点为罕见病的诊治提供有力支持。
遗传性代谢障碍相关罕见病
新生儿遗传代谢障碍多为罕见病，发病率较低。通过串联质谱技术对琥珀酰丙酮、多种氨基酸和肉碱进行检测可对多种遗传代谢病（氨基酸代谢病、有机酸代谢病和脂肪酸代谢病）进行筛查，此种方法也是多个遗传代谢病筛查专家共识里的推荐方法。新生儿遗传代谢病筛查（新筛）还是基于MSMS的初筛，会存在其他代谢物干扰，对于部分遗传代谢病疑似阳性患者也会进行LC-MS/MS的二级筛查来辅助疾病的判读，比如甲基丙二酸血症。通过LC-MS/MS技术对多种极长链脂肪酸进行检测还可用于X-连锁肾上腺脑白质营养不良（X-ALD）疾病的辅助诊断，而且在多种极长链脂肪酸中，C22:0、 C24:0、C26:0 及其比值为疾病判读较为灵敏和特异的指标。
维生素代谢相关罕见病
低磷性佝偻病、CYP24A1突变导致的特发性高钙血症都是与维生素D代谢相关的疾病。低磷性佝偻病一般表现为25OHD3正常或稍低，1,25(OH)2D3明显降低。CYP24A1突变导致的特发性高钙血症则24,25(OH)2D3明显降低。LC-MS/MS可对25OHD2、25OHD3、1,25(OH)2D3、24,25(OH)2D3及相关指标同时检测，精准可靠，避免了免疫学方法存在的交叉干扰、检测结果不准确的问题。
IgG4相关性疾病
IgG4相关性疾病是一类慢性、进行性炎症伴纤维化和硬化疾病，发病原因不明。采用LC-MS/MS可在一次进样中完成对4种IgG亚型及IgG总量共5个指标同时测定，且IgG亚型的加和值和直接测得的IgG总量的相关性优于免疫比浊法，对于IgG4相关性疾病的判读更为准确。
帕金森病
帕金森病（PD）作为阿尔兹海默症外最常见的神经退行性疾病。近些年研究显示N1,N8-二乙酰亚胺可能是诊断PD的生物标志物，嘌呤代谢物是PD恶化或改善的标志物。目前LC-MS/MS技术可实现6种嘌呤分子的同时测定，有望在PD的诊疗中发挥重要作用。
LC-MS/MS在临床应用中面临的挑战
LC-MS/MS技术在疾病诊断中虽然有明显优势，应用范围广阔。但其在临床应用中也存在相应的问题，主要有：
■ 1）LC-MS/MS技术目前尚存在自动化程度低、 仪器昂贵、配套试剂和质控品欠成熟等问题；
■ 2）某些临床有需求的项目尚未建立方法学收费标准，致使工作进一步开展受到限制；
■ 3）不同实验室的室间结果一致性有待提高；
■ 4）基于LC-MS/MS技术疾病判读参考范围或医学决定水平有待完善。
随着LC-MS/MS技术的发展，制约LC-MS/MS技术临床应用的瓶颈会逐渐解决，在临床的应用也会越来越广。我们也相信这一精准技术，在实验诊断领域大有可为。
参考文献
[1]禹松林, 王丹晨, 邹雨桐,等. 液相色谱串联质谱技术在罕见病诊断中的临床应用[J]. 协和医学杂志, 12(4):6.
[2]程子韵, 郭玮. 液相色谱-串联质谱在肾上腺偶发瘤临床诊疗中的应用[J]. 中华检验医学杂志, 2021, 44(08):669-673.
[3]黄宪章. 液相色谱-串联质谱临床推广与应用面临挑战[J]. 中华检验医学杂志, 2021, 44(08):661-663.
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