分析测试百科网

搜索

分析测试百科网 > 行业资讯 > 微信文章

【排忧解难】几招小诀窍帮你搞定“大峰怪”-液相峰型问题大汇总

RIGOL分析仪器
2016.6.30

关于“排忧解难”

在实验过程中,经常会碰到一些看似棘手的问题,其实本不是什么难事儿,只要理解了原理,找出了病症,对症下药即可药到病除。


峰型问题是做色谱分析实验时经常会碰到的问题,在做色谱分析时,我们需要变换不同的条件改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰,要区别对待,从关键因素入手,一个一个加以解决。


下面,小编就列举几个经常兴风作浪的“峰怪”,并教你几招搞定它!


fa39bbdf8bbb65be428485482530777a.jpeg

一、色谱图中未出峰  

69a4370fde5998bb2f6ebde89843ec58.jpeg

翻了翻“RIGOL宝典”RIGOL分析仪器公众号-知识助手-常见问题篇)


原来可能是这些原因导致的:


手动进样方法错误;
自动进样器未设置进样体积,默认为0;
样品过期或变质,分解;
泵未输液,有气泡;
流动相使用不正确,比例不正确等;
色谱柱选择错误; 
检测器设置波长不正确…


不说了,一一排查去了(再也不见的表情…)


二、一个峰或几个峰是负峰  

                   6ae547e343608fba2aca72267e591524.png
       

可能是因为:


流动相吸收本底高;
进样过程中进入空气;
样品组分的吸收低于流动相…


三、所有峰均为负峰  


4f585c2f34627458bd36605cb6f62195.png


可能是因为:

 

信号电缆接反;
检测器输出极性设置颠倒;
色谱工作站中正负峰设置错误;
光学装置尚未达到平衡…

四、所有峰均为宽峰  

bcf61f95021954507c80c57f94debcf5.png

可能是因为:


系统未达到平衡;
溶解样品的溶剂极性比流动相差很多;
色谱柱尺寸及类型选择不正确;
色谱柱或保护柱被污染或柱效降低;
温度变化造成的影响...

五、所出峰比预想的小  


e6e0c0b91e1d58ff389cef1241e8bbcf.jpeg


可以从以下原因分析:


样品黏度过大;
进样品故障或进样体积误差;
检测器波长设置不正确.
定量环体积不正确;
检测池污染;
检测器灯出现问题...


六、出现双峰或肩峰 

  
6f47f10291f6ddd84c0fda311d89e866.png

可以从以下原因分析:

 

进样量过大;
样品浓度过高;
保护柱或色谱柱柱头堵塞;
保护拄或色谱柱污染或失效;
柱塌陷或形成短通道…


七、前沿峰


956d4e38d3773633c7d1ebb617b85945.png

可以从以下原因分析:

 

柱温低

进样量或样品浓度高;

溶解样品的溶剂较流动相极性强;

保护柱或色谱柱污染或失效;

目标峰中包裹其他杂峰未达到分离...


八、拖尾峰


a547c35b023b06ee1d4d6eefd39b2b5b.png


会不会是这样的:


定体积量管与阀连接处出现死区(死体积);

进样针(阀)内有污染或不干净;

色谱柱老化、柱效低;

色谱柱选择不当,试样与固定相间有作用;

进样技术差;

样品在流动相中溶解度小;

进样量太大(过载);

色谱柱进出口的连接管连接处出现死区(死体积);

检查预柱(保护住);

二级保留效应,反相模式;


九、出现平头峰 


会不会是这样的:


检测器设置不正确;
进样体积太大;
样品浓度太高...


十、出现鬼峰 


e3e6911f8eb6ac449dd5d1bdbdb1dd3f.jpeg

会不会是这样的:


进样阀残余峰,可能为上次样品的残余:
样品中存在未知物;
流动相污染;


十一、峰分叉 


可能也会是这样的:


保护柱或分析柱污染:
样品溶剂不溶于流动相-改变样品溶剂,如果可能采取流动相作为样品溶剂...


十二、峰变形 

可能也会是这样的:


样品过载;


十三、早出的峰变形 


你可以这样:


样品溶剂选择不恰当
①减少进样体积 
②运用低极性样品溶剂

十四、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰  


你可以这样:


柱外效应
 ①调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)
 ②使用小体积的流通池 

十五、酸性或碱性化合物的峰拖尾 

你可以这样:


缓冲不合适
①使用浓度50~100 mM的缓冲液
②使用Pka等于流动相pH值的缓冲液

十六、额外的峰


可能的话,这样去排查:


(1)样品中有其他组分:正常现象;

(2)前一次进样的洗脱峰:
①增加运行时间或梯度斜率
②提高流速;

(3)空位或鬼峰:
①检查流动相是否纯净 
②使用流动相作为样品溶剂
③减少进样体积。


OK!实验室的亲们:能有毅力看到这里,王老师很是欣慰啊...

9f6d866a0adda7894a11e8f9f8ae054c.jpeg


好了,王老师答应你们的小诀窍要来了...


(以下为演示诀窍)


be77dea8cfc36dcd3f17eec688ed5668.jpeg


(以下才是真的诀窍)


关注“RIGOL分析仪器”公众号,在左下角【知识助手-常见问题】里包含解决峰怪的所有小诀窍喔,快去关注吧^_^


以上,王老师只是想告诉大家一个遇到问题后解决问题的思路,具体的实践过程还是得靠大家亲手思考。


话不多说,今天就到这里(散场music eea22d639f4c0b15d38ce9019a51583b.gif


RIGOL原创,转载请注明出处。


···

我们致力于做一个

分享干货的色谱知识平台

a0d756241df38778c02d0610b6e7803e.jpeg
RIGOL分析仪器官方微信


发布需求
作者
头像
仪器推荐
文章推荐