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别让加合峰影响了您的质谱解析!

沃特世
2019.8.08

你 知 道 吗?

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钠、钾加合物历来都是蛋白质和肽类电喷雾电离(ESI)质谱分析面临的一大难题。虽然痕量金属污染物通常不会影响蛋白质或肽的分离,但它们可能会让质子化离子的相对丰度失真,令光谱变得复杂,进而影响质谱解析。

众所周知,钠和钾加合物很难去除,因为它们可能来源于样品前处理和仪器操作过程中的多种污染源,会对复杂体系质谱图(例如蛋白药物肽谱图)造成挑战!

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以上图为例,让我们来分析mAb胰蛋白酶酶解标准品的轻链T13肽(序列VQWK)的提取离子流。可以看到,即便使用LCMS分析用水,仍然可能得到差异相当大的10.62%钠加合峰面积,也会造成未加合峰的峰面积减少25%。

如果遇到复杂的样品,所关注的目标分析峰本身灵敏度较低,加合物更容易导致目标峰不慎遗漏丢失。

怎么办?

 微量级别的钠、钾来源多样,在样品制备阶段和仪器操作阶段都有可能引入,需要做好相应预防。

 对于挑战性的LCMS分析任务,确保使用最高纯度级别的流动相与试剂尤为重要。

 溶剂瓶可以考虑采用非玻璃材质,以最小化金属离子的溶出干扰。

 沃特世推荐经认证的低密度聚乙烯(LDPE)材质溶剂瓶,经过严格QC测试确保钠钾级别在100ppb以下。

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同样我们以上文所述实验为例,针对同一标准品,但我们使用实验用纯化水,配制含0.1% IonHance 二氟乙酸试剂(p/n:186009201)的流动相,存放在经过认证的LDPE溶剂瓶(p/n:186009110),从而得到的质谱提取图(如上图)。可以看到,我们得到了更为真实的峰丰度,这极大地有利于质谱解读数据,让您的质谱分析更为轻松。
点击“阅读原文”,了解更多应用详情。

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