什么是伏马菌素?
伏马菌素是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成的结构类似的双酯化合物,主要由串珠镰刀菌和再育镰刀菌代谢产生的一类真菌毒素。伏马菌素容易污染玉米、稻谷等粮食谷物,会对多种动物的肝脏、肾脏造成损伤甚至引发肿瘤问题。另外,人类食道癌和神经管型缺陷病也可能与伏马菌素有关,这使得伏马菌素逐渐成为继黄曲霉毒素之后的一大研究热点。
《食品安全国家标准》(GB 5009.240-2016)早已对伏马菌素的检测做出规定,为实验室日常检测提供了依据。2020版《中国药典》则将通则《2351》由2015版的《黄曲霉毒素测定法》变更为《真菌毒素测定法》,并增加了真菌毒素的检测种类,包括液质联用,以及伏马菌素 (Fumonisin FB) 等在内的十种真菌毒素测定方法。
分析难点:
在以往业内对伏马菌素的检测中,常常出现不出峰或峰形拖尾严重、残留、重现性不良等现象,这主要是因为伏马菌素结构中多个羧基及氧原子的存在(电负性)容易导致化合物与传统液相系统会上的金属发生特异性吸附。
图1:伏马菌素化学结构式。
为解决该问题,沃特世应用实验室基于最新发布的ACQUITY Premier系统及ACQUITY Premier色谱柱,推出了ACQUITY Premier 真菌毒素之伏马菌素方案,一起来看看吧!
伏马菌素方案:
实验方法:
LC系统和色谱柱:ACQUITY Premier系统 + ACQUITY Premier BEH C18, 2.1×100mm, 1.7 µm;
MS 系统:XEVO TQ-S micro;
流动相 A:水(含0.1%甲酸);
流动相 B:甲醇/乙腈=50/50;
流速:0.3 mL/min;
柱温:45 ℃ ;
进样量:3 µL;
梯度条件:
毛细管电压:1.0kv( ESI+),1.5kv(ESI-);
离子化方式:ESI;
锥孔反吹气流量:50L/Hr;
脱溶剂温度:650 ℃;
脱溶剂气流量:950 L/Hr。
伏马菌素FB1、FB2实验结果:
灵敏度提升
图2:伏马菌素FB1、FB2实验的灵敏度。
ACQUITY Premier系统搭配ACQUITY Premier色谱柱可实现优异的灵敏度:
图3:ACQUITY Premier系统搭配ACQUITY Premier色谱柱可实现的灵敏度。
峰面积、峰高增强
图4:伏马菌素FB1、FB2实验的峰面积、峰高。
残留降低
图5:伏马菌素FB1、FB2残留。
定量方法
FB1、FB2定量限S/N>10,均能满足定量限的要求;
离子化方式:ESI;
FB1、FB2校正曲线线性范围:0.1~25 ng/mL,R2>0.999,线性关系良好;
重复进样6针(标样),峰面积RSD%均在5%以内,仪器稳定性优异!
图6:FB1、FB2校正曲线。
从以上结果可以看出,ACQUITY Premier方案(ACQUITY Premier系统和 ACQUITY Premier 色谱柱)可以避免传统不锈钢仪器引起的FB1、FB2吸附,大大改善FB1、FB2的峰形,从而避免了系统残留,提高了检测灵敏度和重现性。
同时,参照《中国药典通则》,采用ACQUITY Premier方案测试了十种真菌毒素。
真菌毒素测试结果
十种真菌毒素结构信息:
图7:十种真菌毒素结构信息。
十种真菌毒素TIC图谱:
图8:十种真菌毒素TIC图谱。
十种真菌毒素灵敏度信噪比(S/N)图谱:
图9:十种真菌毒素灵敏度信噪比(S/N)图谱。
参照《中国药典》薏苡仁前处理方法,平行测定三份薏苡仁样品,以外标法拟合,共检测出薏苡仁样品中含有伏马菌素FB1、FB2、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮四种真菌毒素,具体含量如下:
图10 :薏苡仁样品中伏马菌素FB1、FB2、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮四种真菌毒素的含量。
更多详尽数据及应用情况将在稍后发布的应用文献中呈现。对ACQUITY Premier方案好奇的您,请参考以下资料:
1. MaxPeak HPS技术知多少?一文带你解析;
2. Analytical Chemistry 发表文章,DOI:10.1021/acs.analchem.0c03863;
3. JPBA发表文章,https://doi.org/10.1016/j.jpba.2021.114076;
4. 阅读沃特世白皮书:基于MaxPeak高性能表面的低吸附UPLC系统:ACQUITY PREMIER解决方案;
5. 详细了解ACQUITY PREMIER解决方案;
6. 详细了解ACQUITY PREMIER解决方案在寡聚核苷酸分析中的应用;
7. 阅读文章:利用创新型ACQUITY PREMIER解决方案降低金属敏感分析物分析中的变异性;
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