前言
山银花为忍冬科植物灰毡毛忍冬、红腺忍冬、华南忍冬或黄褐毛忍冬的干燥花蕾或带初开的花。主要功效为清热解毒,疏散风热。用于痈肿疔疮,喉痹、丹毒,热毒血痢,风热感冒,温热发病。在2020版药典中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙是作为山银花质量控制的指标成分,而二者紫外吸收很弱,采用紫外检测器测试时基线噪声大、重现性不好,所以通用性检测器ELSD检测器成为检测的首选。
实验条件
实验仪器
使用配备了6100泵、6210自动进样器、6310柱温箱、6450 ELSD蒸发光检测器的LC6000液相相色谱仪进行实验。见图1 LC6000
▼ 图1.LC6000
试剂样品
标准品:
灰毡毛忍冬皂苷乙(C65H106O32 ,CAS:136849-88-2)
川续断皂苷乙(C53H86O22,CAS:33289-85-9)。
标准溶液配制:在容量瓶内预先加入一定量50%甲醇溶剂,称取适量的标准品,并用50%甲醇定容混匀。制成每1ml含灰毡毛忍冬皂苷乙0.6mg、川续断皂苷乙0.2mg。液相条件详见表1。
▼ 表1.液相色谱条件
实验结果
系统适用性
使用上述的仪器条件,进样量10uL,分析灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙。所得到的谱图如图2所示,结合表2,可以看出峰型良好,完全满足相关国家标准要求。
▼ 图2. 灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙对照品的检测谱图
▼ 表2. 灰毡毛忍冬皂苷川续断皂苷乙相关参数
重复性测试
分别在同一时间连续进样6次,考察ELSD对灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的重复性结果,结果如表3所示,保留时间、峰高、峰面积RSD值均小于1%,完全满足标准要求。
▼表3. 重复性结果(n=6)
结论
本应用介绍了使用天美液相色谱仪,采用自动进样器进样方式分析灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙检测方法,符合国家药典2020版标准要求,该方法配置合理,结果可靠。