一文读懂｜Gibco B-27的前世今生

当培养基中含有血清、单层星形胶质细胞或星形胶质细胞条件培养基等不确定成分时，很难研究直接影响神经元发育的因素。此外，当细胞密度很高时，很难通过单个细胞的互作来研究突触发生和神经网络。当有神经胶质细胞支持培养时，成分确定的培养基通常可支持分离脑细胞的神经元培养，但需要控制神经元密度>100,000 个细胞/cm2）或<15,000 个细胞/cm2。同时，大多数培养细胞在 5% CO2、95% 空气的环境中生长，这代表培养箱中的氧气浓度为 19.7% (160 mm Hg)。由于动脉血氧分压为 98mm Hg (13.7%)，静脉血为 13 mm Hg (1.6%)，脑脊液氧分压为 41 mm Hg (5%) ，因此对于神经细胞来说，标准培养箱条件为强氧化性。综合来看，学界需要一款能支持神经元密度<5,000 个细胞/cm2时，神经元的长期培养并足以观察单个细胞之间的连接，无血清、成分确定、低氧化性的培养基。

1989年，Brewer et al. 研究出了一款成分确定的培养基B18，其包含32种成分来支持低细胞密度时海马神经元的体外培养。该培养基一个关键特征是将氧浓度降低至生理水平，并使用含有抗氧化剂的物质。

1993年，Brewer et al. 优化了B18和DME/F12培养基中一些成分的浓度，以此降低培养基的渗透压和毒性，最终形成了只包含20种成分的B-27无血清添加剂，成分如下表。同年，Dr. Greg Brewer与Thermo Fisher Scientific合作推出了Gibco品牌旗下商品化添加剂，Gibco™ B-27添加剂、Gibco™ Neurobasal培养基。