实验目的：

　　苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法，简称HE染色方法，是常规病理制片最基本的染色，能够对正常组织和病理组织进行形态结构的观察。

　　实验原理：

　　苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

　　实验材料和试剂：苏木精染液，伊红染液，1%盐酸乙醇分化液，碳酸锂饱和液，二甲苯，蒸馏水等。

　　染色步骤与方法：

　　1、烤片：1小时，温度65℃(目的：使组织切片与载玻片贴合的更加紧密)

　　2、切片脱蜡至水：

　　(1)二甲苯Ⅰ：15min

　　(2)二甲苯Ⅱ：15min

　　(3)无水乙醇Ⅰ：3-5min

　　(4)无水乙醇Ⅱ：3-5min

　　(5)95%乙醇Ⅰ：3-5min

　　(6)90%乙醇：3-5min

　　(7)80%乙醇：3-5min

　　(8)70%乙醇：3-5min

　　(9)50%乙醇：3-5min

　　(10)蒸馏水洗：5min

　　3、染色：

　　(1)苏木精染色：2-5min

　　(2)蒸馏水洗：1min

　　(3)1%盐酸乙醇分化：3-5s

　　(4)蒸馏水洗：2min

　　(5)碳酸锂：约1min

　　(6)蒸馏水洗：15min

　　(7)伊红染色：10-30s

　　(8)蒸馏水速洗

　　4、脱水、透明、封固

　　(1)50%乙醇： 5min

　　(2)70%乙醇：5min

　　(3)80%乙醇：5min

　　(3) 90%乙醇：5min

　　(4) 95%乙醇：5min

　　(5) 无水乙醇Ⅰ：5min

　　(6) 无水乙醇Ⅱ：5min

　　(7) 二甲苯Ⅰ：5min

　　(8) 二甲苯Ⅱ：5min

　　(9) 中性树胶封固

　　客户提供样品：

　　1，组织样本材料要新鲜，组织离体后应立即投入固定液(10%中性甲醛、4%多聚甲醛，)中。

　　2，细胞样本离心后弃去上清液加入3%戊二醛固定液。

　　实验周期：收到样品2~4周内提交结果

　　染色结果

　　提供结果 ：1.染色后的切片; 2.每张切片提供一张照片; 3.完整的实验报告，包括具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器等，将以电子或书面形式提交