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产品描述

案例：凋亡抑制蛋白xx在肺癌中的表达及其功能的研究 实验分组为：未转染组，阴性对照组，阳性对照组（实验组）

1、靶向xx基因的RNA干扰对肺癌生物学功能影响的研究
1.1 构建针对XX基因的进行RNA干扰的病毒载体
1.2 将该病毒载体转染入高表达xx基因的肺癌细胞株。
1.3 检测干扰前后Caspase-3, Caspase-9酶的活性情况
1.4 生物学功能检测。
(1) MTT检测细胞增殖情况
(2) 流式细胞仪检测细胞周期
(3) 流式细胞仪检测细胞凋亡
(4) TUNEL检测细胞凋亡
(5）电镜观察细胞凋亡
(6) 平板克隆实验检测细胞增殖
(7) 检测细胞侵袭转移情况

2. 干扰后肺癌细胞生物学功能的检测： 转染分组为：未转染组，阴性对照组，化疗药组，化疗药联合RNA干扰组

（1）RNA干扰联合化疗药（自选）对肺癌生物学功能影响的研究；
（2）构建病毒载体同上。

生物学功能检测
(1) MTT检测细胞增殖情况

(2) 流式细胞仪检测细胞周期
(3) 流式细胞仪检测细胞凋亡
(4) TUNEL检测细胞凋亡
(5）电镜观察细胞凋亡
(6) 平板克隆实验检测细胞增殖
(7) 检测细胞侵袭转移情况

3．动物实验
RNA干扰动物实验
(1)将肺癌细胞注射到裸鼠（4-6周龄）皮下，同时将培养稳定生长的干扰的细胞株也注射入裸鼠上，或者当肿瘤长大后将干扰病毒直接注入裸鼠肿瘤中，裸鼠分组为：正常细胞组，阴性对照组（注射生理盐水或其他阴性对照），RNA干扰组。处理后观察后裸鼠肿瘤的生长情况。
(2)处理后观察半个月到一个月，然后将裸鼠处死，取下肿瘤标本，免疫组化，实时定量PCR，Western blot方法中的检测目的基因的表达变化。
(3)对取下的肿瘤标本采用TUNEL检测细胞凋亡，电镜观察细胞凋亡。

4．蛋白组学和质谱分析
将RNA干扰前后的目的细胞进行蛋白组学研究，寻找差异蛋白。找到的差异蛋白进行质谱分析后用WB来鉴定。（威斯腾生物--原代培养、细胞敲除、模式动物一站式科研服务！）

价格：面议

慢病毒介导动物实验、细胞实验

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威斯腾生物