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150
细胞克隆形成实验
产品属性
品牌
研载生物
产地
全国
型号
细胞克隆形成实验
关注度
0
信息完整度
价格范围
1-500
关闭
产地:全国; 品牌:研载生物
研载生物科技(上海)有限公司
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产品描述
细胞克隆形成实验
一、技术简介
细胞克隆形成实验
是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等的重要技术方法。实验方法包括平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强;初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强。由于克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。
当单个细胞在体外增殖
6
代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有
50
以上的细胞,大小在
0.3-1.0 mm
之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测,细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
二、实验流程
A
.平板克隆形成实验:适用于贴壁生长的细胞。
1.
取对数生长期的各组细胞,制备细胞悬液。
2.
将细胞悬液作梯度倍数稀释,分别接种含培养液的皿中,培养
2-3
周。
3.
经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。
4.
弃去上清液,
4%duo
聚甲醛固定,
GIMSA
染色液染
10-30 min
。
5.
计算克隆形成率,克隆形成率
=
(克隆数
/
接种细胞数)
× 100%
。
6.
结果统计分析。
B
.软琼脂克隆形成实验:适用于非锚着依赖性生长的细胞。
1.
制备细胞悬液,梯度倍数稀释。
2.
分别制备
1.2%
和
0.7%
琼脂糖溶液。
3.
下层琼脂凝固后放入
37
℃
培养箱备用。
4.
加入细胞悬液,待上层琼脂凝固后,培养
10-14
天。
5.
计算克隆形成率,克隆形成率
=
(克隆数
/
接种细胞数)
× 100%
。
6.
结果统计分析。
三、服务说明及结果
1.
客户提供:细胞株,所需药品,药物处理方式和浓度。
2.
公司提供:原始数据及分析结果、完整的实验报告。
3.
实验周期:
20-40
个工作日,
具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。
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