原代细胞分离提取
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原代细胞分离提取

产品属性

  • 品牌怀信生物
  • 产地江苏无锡
  • 型号原代细胞分离提取
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无锡怀信生物医药科技有限公司

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产品描述
                           一、原代细胞的分离提取服务介绍
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代性作用。

二、原代细胞的分离提取服务内容

(一)机械分散法
1、纤维成分很少的脑组织,部分胚胎组织,用剪刀剪碎至1mm3的组织块。
2、用PBS清洗两次后
①用吸管吹打,分散组织细胞。
②或将已充分剪碎分散的组织放在注射器内(用九号针),使细胞通过针头压出。
③或在不锈钢纱网内用钝物(注射器钝端)压挤使细胞从网孔中压挤出。
3、收集细胞转入离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。
4、去上清,加入含血清的培养基,重悬后移至培养瓶中培养。
(二)消化分离法
1、酶消化分离法(过夜冷消化法)

①细胞间质较少的软组织,如肝、肾、甲状腺、羊膜、胚胎组织、上皮组织等,用Hanks液清洗组织三次,剪成碎块大小为4毫米左右。
②再用Hanks液洗2-3次以除去血球和脂肪组织。
③加入0.25%的胰蛋白酶,摇匀后放4℃过夜。
④次日再用Hanks液洗涤,弃去上清,共洗2-3次。
⑤加入少量含血清的培养基吹打分散,细胞计数,按适当的浓度分瓶培养。

2、非酶消化法(EDTA消化法)
①把组织块剪碎,呈1mm3大小的组织块。
②将碎组织块在平皿中用无钙镁PBS洗2-3次。
③加入消化液(胰蛋白酶或胶原酶或EDTA)于37℃水浴中作用适当时间(中间可轻摇1~2次),若组织块膨松呈絮状可终止,若变化不大可更换一次消化液,继续消化直至膨松絮状为止。
④弃去上清,加入含有钙、镁离子的培养基中止消化反应,并洗涤2-3次后,加入完全培养基。
⑤用吸管吹打,使细胞充分散开后用纱网过滤后分瓶培养。


三、原代细胞分离提取服务说明
1、明确告知所需种属的某个部位细胞;
2、所需细胞量;
3、纯度的要求;
4、若另有疑问欢迎向本公司咨询,我们将竭诚为您服务。


四、质量承诺
1、真实的发货原始图片;
2、权威的实验报告;
3、详细的实验步骤


五、实验结果展示



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