常用的测定NK和LAK细胞活性的方法较多,如攩51Cr释放法、[3H]TdR参入法或释放法、LDH释放法、ATP发光法等;应用放射性同位素对人体和环境不利,利用FCM测定NK和LAK细胞活性从1986年就开始摸索,方法已趋于成熟,以下介绍其中一种:肝素抗凝取外周血后分离PBMC后洗净,调整细胞浓度为106/ml,为效应细胞;靶细胞分别为K562和HL-60或HeLa细胞,在对数生长期受集细胞,...
相关专题实验室的CT-流式细胞仪应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBS C)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干/祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种FACS检测CD34+细胞方法的异同。...
实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一、外周血细胞样本制备方法的选择一般检测细胞大分子成分---DNA、RNA、蛋白质的含量、基因表达蛋白等,多采用淋巴细胞分离液分离法制备单个核细胞悬液。这样就可以从血液中分离出单个核细胞---淋巴细胞、单核细胞、幼稚血细胞和肿瘤细胞等。外周血免疫细胞、细胞生长因子、某些基因蛋白、细胞表面标志检测可来用溶红细胞法。二、单个核细胞样品制备程序1....
然后将转染的细胞在湿润的CO2培养箱中37℃孵育48小时。5.T细胞受体敲除的验证孵育48小时后,将一部分细胞用PE抗人α/β TCR抗体进行染色,用于流式细胞术分析。使用Invitrogen™ Attune™ NxT流式细胞仪和以下方案测量群体中TCR阴性细胞的百分比,以对TCR敲除效率进行定量。...
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