核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是必不可少的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都具有共轭双键,所以具有紫外光吸收性质。...
若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。...
检测原理 微量紫外分光光度法检测的是核酸的纯度和含量,DNA和RNA在260nm处有最大的吸收峰,蛋白质在280nm处有最大的吸收峰,盐和小分子则集中在230nm处。因此,可以用260nm波长的吸光度测定DNA或RNA浓度,其吸收强度与DNA和RNA的浓度成正比。 对于一个核酸样品,建议先电泳检测,再用紫外分光光度仪检测,电泳可以判断样品是否提取成功,以确认是否还需进行纯度和浓度测定。...
2019新型冠状病毒本质上是一种RNA病毒,那么可以采取紫外可见分光光度法测定核酸的浓度和纯度。紫外可见分光光度法是能够根据260和280nm处的吸光度值确定核酸纯度和浓度的首选技术。核酸在260nm处显示最大吸光度,而蛋白质的最大吸光度在280nm处。核苷酸组分的吸光度DNA吸收光谱实际上是单个核苷酸吸光度的总和。...
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