目前为止大多数研究探讨骨髓间充质干细胞力生物学时已经使用2D/3D体外试验。 体外实验均表明基质或基质刚度在调节骨髓间充质干细胞向特定谱系分化方面起到关键作用。接种到软基质骨髓的间充质干细胞更多的向脂肪细胞和软骨细胞分化,而接种在刚度基质的骨髓的间充质干细胞有较强的肌性分化潜能,这种差别不依赖于化学和生物化学诱导剂。牵引力和刚度基质介导与整合素结合,直接作用于间充质干细胞谱系改变。...
3.2.4节-抗体产生试验 中提到,“病毒特异性PCR或靶向分子生物学方法可用作表3中所述动物试验的替代检测方法。”对内源病毒和外源病毒的检测方法有很多,(R2)版中新增了全面测定策略应该考虑要点:细胞系来源;传代历史;在细胞系生成、细胞库制备及生产过程中使用的生产用原材料和试剂。该策略还应包括根据对细胞基质、原材料和所用试剂的风险评估进行适当的其他检测。...
无血清蛋白的结合抗生素的使用像其它化合物一样抗生素结合到血清的血浆蛋白上,尤其是白蛋白片段。因此,在无血清和白蛋白的条件下同样的抗生素浓度将显示出较高的生物活性,且增加的活性将对细胞生长造成有害影响。尤其是链霉素会干扰哺乳动物细胞蛋白合成水平。如果无抗生素培养是不可行的,我们建议使用浓度为50mg/L的庆大霉素。2.3.2....
具有成瘤性的新建细胞或新型细胞基质,需采用定量的方法进一步分析细胞成瘤性的大小,并计算该细胞的半数致瘤量(TPD50),并根据生产工艺及制品的特性,评估成瘤性的风险。 体内法是成瘤性评价的标准,但对于某些细胞,也可采用软琼脂克隆形成试验或器官培养试验等体外法检测细胞的成瘤性,特别是对于低代次、在动物体内无成瘤性的传代细胞系。体外法的结果可作为细胞成瘤性评价的参考。 7....
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