ASTM E2186-02a
用彗星分析法测定真核细胞中DNA单线损伤的标准指南

Standard Guide for Determining DNA Single-Strand Damage in Eukaryotic Cells Using the Comet Assay


标准号
ASTM E2186-02a
发布
2002年
发布单位
美国材料与试验协会
替代标准
ASTM E2186-02a(2010)
当前最新
ASTM E2186-02a(2023)
 
 
适用范围
1.1 本指南涵盖了进行单细胞凝胶电泳测定 (SCG) 或彗星测定以测量真核细胞中 DNA 单链断裂的推荐标准。彗星测定是一种非常灵敏的方法,用于检测单个细胞 DNA 中的链断裂。大多数利用彗星测定的研究都集中在医学应用上,因此在体外和体内检查了哺乳动物细胞的 DNA 损伤 (1-4)。人们越来越有兴趣将该测定应用于淡水和海洋生物中的 DNA 损伤,以探索 DNA 损伤的环境影响。
1.1.1 彗星测定已用于筛选多种化合物对体外和体内细胞的遗传毒性(5-7),以及评估各种化合物的剂量依赖性抗氧化(保护)特性 (3, 8-11)。据报道,使用这种方法,与参考地点相比,从污染地点的生物体收集的细胞中 DNA 损伤水平显着升高 (12-15)。研究还发现,细胞 DNA 损伤的增加与生长、存活和发育下降等高阶效应相对应,并与污染物体负荷的显着增加相关 (13, 16)。
1.2 本指南介绍了促进表达的方案DNA 碱不稳定单链断裂及其相对于对照或参考细胞丰度的测定。该指南是通用指南,旨在让实验室人员熟悉进行彗星测定所需的基本要求和注意事项。它不包含该测定的可用变体的程序,这些变体允许确定非碱性不稳定单链断裂或双链 DNA 链断裂 (8)、区分不同细胞类型 (13)、识别正在凋亡的细胞(程序性细胞死亡,(1, 17)),测量细胞 DNA 修复率(10),检测光活性 DNA 损伤化合物的存在(14),或检测特定 DNA 损伤(3, 18)。
1.3 本标准并不旨在解决与其使用相关的所有安全问题(如果有)。本标准的使用者有责任在使用前建立适当的安全和健康实践并确定监管要求的适用性。
1.3 本指南的安排如下:部分范围1参考文件2术语3指南摘要4意义和使用5设备和试剂6测定程序7数据处理8报告数据9关键词10附录A1参考文献

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