找不到引用ASTM E1532-00(2006) 用二苯甲酰胺与DNA结合荧光染料法检测细胞培养中支原体污染物的标准实施规程 的标准
试剂 (1)二苯甲酰胺荧光染料浓缩液 称取二苯甲酰胺荧光染料5mg ,加人100ml 不含酚红和碳酸氢钠的Hank 's 平衡盐溶液中,室温下用磁力搅拌器搅拌30~40 分钟,使完全溶解,-20℃ 避光保存。 (2)二苯甲酰胺荧光染料工作液 无酚红和碳酸氢钠的Hank ' s 溶液100ml 中加人二苯甲酰胺荧光染料浓缩液lml ,混匀。 ...
将细胞制成105/ml的悬液,加入6孔细胞培养板,添加物抗生素培养基后,于5%二氧化碳孵箱36℃±1℃培养过夜。将供试品加入指示细胞板中,置5%二氧化碳孵箱36℃±1℃培养3-5天。指示细胞培养物至少传代一次。末代传代的细胞用二苯甲酰胺荧光染料进行染色后,在显微镜下进行观察。同时用无抗生素培养基和已知阳性的标准菌种进行同法操作,分别作为阴性和阳性对照。...
DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞,如果原样本中含有支原体,那么当细胞DNA被荧光染料(如Hoechst染料)染色时,就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。分离培养法用来检测支原体M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以准确的将其检测出来。 PCR法 PCR 法也可以检测M....
Life Technologies公司的CyQUANT细胞增殖试剂盒是一个敏感性高、可重复并且简便的做荧光微孔板检测的方法。CyQUANT的GR染料可标记到细胞核上,通过荧光来计算细胞个数。DNA与RNA的比例会随着细胞周期的变化而改变,因此,CyQUANT试剂盒可以通过RNA酶溶解产物和核酸量做标准曲线。...
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