ASTM E1262-88(2008)
中国仓鼠卵巢细胞/次黄质鸟嘌呤转磷酸核糖基酶基因变异鉴定的标准指南

Standard Guide for Performance of Chinese Hamster Ovary Cell/Hypoxanthine Guanine Phosphoribosyl Transferase Gene Mutation Assay


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标准号
ASTM E1262-88(2008)
发布
1988年
发布单位
美国材料与试验协会
替代标准
ASTM E1262-88(2013)
当前最新
ASTM E1262-88(2018)
 
 
适用范围
CHO/HGPRT 检测可检测中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中 X 连锁次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (hgprt) 位点（编码该酶 HGPRT）的正向突变。将最初源自中国仓鼠卵巢组织的细胞暴露于测试物品中，并在适当的细胞培养方案后，监测原始处理群体的后代是否由于突变而丧失功能性 HGPRT。对嘌呤类似物6-硫鸟嘌呤(6TG)（或不太理想的8-氮鸟嘌呤(8AG)）的抗性被用作遗传标记。 HGPRT 催化无毒的 6TG 转化为其有毒的核糖磷酸化衍生物。因此，酶或其活性的丧失会导致细胞对 6TG 产生抗性。由于 HGPRT 是嘌呤核苷酸挽救途径的一种酶，因此该酶的损失并不是致命事件。理论上，不同类型的突变事件（碱基替换、移码、缺失、某些染色体类型损伤等）应该可以在 hgprt 基因座上检测到。 CHO/HGPRT 测定已用于研究多种诱变剂，包括辐射 (2-4)、多种化学品 (1) 和复杂的化学混合物 (5)。
1.1 本指南重点介绍了一些更重要的诱变剂。概述了目前所理解的相关生物学概念，并总结了目前所认识和实践的可接受的生物测定性能的关键技术方面。中国仓鼠卵巢细胞/次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（CHO/HGPRT）测定（1）已广泛应用于工业和环境化学品的毒理学评价。
1.2 本指南集中于细胞培养、诱变程序、数据分析、质量控制和测试策略的实践方面。建议的方法代表了小组成员对检测性能的共识。然而，应该理解的是，这些只是一般准则，在没有使用合理的科学判断的情况下不应遵循。测定的用户应根据待测试物质的特性和要回答的问题评估他们的方法。
1.3 偏离基于合理科学判断的指南决不应该使所获得的结果无效。
1.4 以 SI 单位表示的值应被视为标准值。本标准不包含其他计量单位。
1.5 本标准并不旨在解决与其使用相关的所有安全问题（如果有）。本标准的使用者有责任在使用前建立适当的安全和健康实践并确定监管限制的适用性。

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