mRNA solexa测序分析服务
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上海敏芯信息科技有限公司

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产品描述
mRNA分析方案
分析目的
首先提取总RNA进行表达谱的solexa 实验,并对实验得出来的差异基因进行进一步的分析,如:聚类分析,GO 分类,Pathway 分析,IF 分析,Data-driven Network 分析及Knowledge-driven Network 分析等。
分析方案
一、差异基因注释及层次聚类
依据不同的分组,筛选出差异基因,然后对所有差异基因首先进行功能注释,对于未知功能的基因进行同源比对。表达值首先经过对数转换,作为层次聚类算法的输入。对三组样品进行层次聚类分析。
二、GO 分析
对差异表达的所有基因向gene ontology 数据库的各节点映射。计算每个节点的基因数目,并结合整个数据库的基因作为背景分部,对于每个节点,得到一个2x2 的表格,使用超几何分布检验基因在每个GO 节点的富集或贫乏程度。
 三、Pathway 分析
与GO 分析类似,我们同样将差异基因使用GenMAPP v2.1 向KEGG pathway 和BioCarta 数据库映射。通过统计方案,找到统计上zei有意义的pathway。
 四、Knowledge-driven Network 分析
通过整合PubMed text mining,同源预测,基因neighbor,蛋白-蛋白相互作用,基因融合等数据,建立一个all differentially expressed genes in a single plot 的调控网络。这是一种已有知识驱动的网络构建。
 . Data-driven Network分析
对差异基因进行Co-expression基因调控网络的构建。采用贝叶斯方法,通过对表达数据进行机器学习,来构建差异基因之间的动态网络。这是一种数据驱动的网络构建,可以发现一些新的调控关系。
六、转录因子分析
利用相关的转录因子(TF)数据库,将差异基因的启动子(基因第一个外显子上游1000bp)提取出来。我们使用HsPD 提供的启动子序列。转录因子数据库使用TRANSFAC 7.0 public。转录因子结合位点预测使用pwmatch 程序,对每个转录因子分析其在上调基因和下调基因的分布情况,利用chi-square test 寻找有差异的转录因子。
鸟枪法solexa数据分析服务内容
适用于将mRNA随机打碎后进行solexa测序的实验。
分析方案
一、Exon-junction方法分析可变剪切
我们建立Exon-junction序列数据库。利用比对分析,可以鉴定出新的可变剪切现象。
 
二、转录本定量
利用单位长度内tag的密度可以准确估计不同转录本的表达量。即:
Reads per KB per million reads (RPKM), using the formula:
R = 109C/NL
 
三、新转录本挖掘
通过建立基因间序列数据库,我们可以寻找新的转录本。
 
四、非编码RNA分析
我们对新的转录本进行编码区预测,没有显著编码区的基因被认为是非编码RNA,可以对其进行实验验证。
 
五、常规GO, pathway分析
1GO分析
对差异表达的所有基因向gene ontology 数据库的各节点映射。计算每个节点的基因数目,并结合整个数据库的基因作为背景分部,对于每个节点,得到一个2x2 的表格,使用超几何分布检验基因在每个GO 节点的富集或贫乏程度。
2pathway分析
与GO 分析类似,我们同样将差异基因使用GenMAPP v2.1 向KEGG pathway 和BioCarta 数据库映射。通过统计方案,找到统计上zei有意义的pathway。
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