AAV腺相关病毒包装
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AAV腺相关病毒包装

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产品描述

 赛业生物采用第2代重组腺相关病毒包装系统制备病毒颗粒。该包装系统包含3个质粒和一株包装细胞株。

1)1个转移质粒:含有两侧有AAVITR序列的转基因表达盒子。

2)1个Rep-cap表达质粒:表达Rep和Cap两个基因。

3)1个辅助质粒:包含来自腺病毒的一些基因(E4、E2a和VA)。这些腺病毒的基因可以促进AAV基因组的复制。

4)1株含有腺病毒E1基因的293细胞。

 

野生型腺病毒基因组是一条长约4.7 kb的线性单链DNA(ssDNA)分子。基因组两末端各有一个145 nt长的Inverted Terminal Repeat (ITR),ITR序列是对称的,自己能形成发夹结构。病毒感染细胞后,释放出单链病毒基因组,末端发夹结构促使腺相关病毒以单链基因组为模板复制互补链,形成双链DNA。野生型病毒只表达2个基因:rep (replication) 和cap (capsid),Rep编码非结构蛋白,Cap编码结构蛋白。腺相关病毒基因组不编码polymerase,基因组DNA的复制需要用到宿主细胞表达的polymerase。将基因组上的Rep和Cap基因删除,克隆到质粒上,然后将目的基因克隆在两个ITR之间,这个质粒就成为转移质粒。而Rep和Cap基因被克隆到另外一个质粒上,成为Rep-cap表达质粒。除了Rep-cap表达质粒,还需要一个辅助质粒。这个辅助质粒表达腺病毒的一些基因(E4、E2a和VA),这些腺病毒基因可以促进AAV基因组的复制。除了3个质粒外,腺相关病毒包装系统还需要一株表达腺病毒E1基因的293细胞。

 

每次包装重组腺相关病毒,辅助质粒均固定不变,只要血清型不变,Rep-cap质粒也是相对固定,变化的是编码目的基因的转移质粒。因此您需重点设计转移质粒,登陆www.vectorbuilder.com即可轻松快捷地设计!

 

腺相关病毒

 

AAV血清型

AAV2是目前使用zei广泛的血清型。不同血清型的腺相关病毒对不同组织有不同的感染性。使用不同的rep-cap质粒与转移质粒包装病毒,可获得不同血清型的腺相关病毒颗粒。下表列举了不同血清型的组织感染性。您可以通过www.vectorbuilder.com选择不同血清型的腺相关病毒包装服务

腺相关病毒包装

 

腺相关病毒生产

生产携带目的基因的重组慢病毒颗粒,过程如下图:

腺相关病毒包装技术

 

首先将转移质粒、Rep-cap质粒和辅助质粒转染到293T细胞。更换新鲜的培养基后,继续培养48小时,然后收集细胞,裂解细胞,进行离心浓缩,即可得到转导细胞级别的病毒颗粒。

 

质量控制

我们对每一批病毒都进行了qPCR滴度检测,严格把控质量,让您百分百放心。

 
服务明细

腺相关病毒包装服务

 

赛业生物不仅提供基因表达慢病毒定制服务,还提供shRNA干扰腺相关病毒定制服务。订制病毒从订制转移质粒开始,登陆www.vectorbuilder.com即可轻松快捷地设计转移质粒!

 

腺相关病毒载体

(一)基因表达腺相关病毒载体

赛业(广州)生物科技有限公司

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