使用 QSight 220 LC/MS/MS 方法分析番茄匀浆中的游离氨基酸

应用领域:蔬菜/水果/蜜饯/酱腌菜等制品

检测样品:番茄

检测项目:使用 QSight 220 LC/MS/MS 方法分析番茄匀浆中的游离氨基酸

参考标准:Ito H, Ueno H, Kikuzaki H (2017) Free Amino Acid Compositions for Fruits. J Nutr Diet Pract 1: 001-005.

方案摘要

介绍 

新鲜产品的氨基酸特征谱可以指示其营 养价值和风味特征,因此,世界各地的许多育种项目都集中在这些性状上。研究新鲜农产品的游离氨基酸含量,了解它们对风味(鲜味为 L- 谷氨酸,甜味为 L-甘氨酸、L-丙氨酸和脯氨酸)和人体健康的影响(已证明支链氨基酸能加速肌肉损 伤和运动后疲劳的恢复)1。 

在本应用文章中,详细介绍了一种用于分析新鲜农产品中游离氨基酸含量的简单 LC/MS/MS 方法。 该方法样品制备过程简单,游离氨基酸可以直接进样分析,无需进行衍生化。 

实验部分 

将 Syngenta 测定氨基酸含量的内部方法转移至珀金埃尔默 LX50 UHPLC 上,未进行任何修改。将最高浓度水平的标准溶液(L1,见表 1)注入至珀金埃尔默 QSight® 220,用以优化 MS/MS 离子对的入口电压和碰撞能量。 

所有仪器控制、数据采集和数据处理均采用 Simplicity™ 3Q 软件平台进行。制备了 7 点校准曲线, 包含多种浓度下的所有氨基酸和固定含量的内标(见表 1)。将番茄样品匀浆并离心,然后用 3kDa  的过滤器过滤上清液。所得液体用去离子水稀释 400 倍,使样品的预期浓度在校准范围内。样品中还 加标有与校准标准品相同水平的氘化内标。

本研究中使用的试剂包括:乙腈、甲酸、氨基酸标准品、氘 化氨基酸标准品和使用 Triple Red 水纯化仪获得的水。 

根据适当的氘代内标对化合物进行定量。 

LC、离子对信息和离子源参数如表 2 - 4 所示。 

结果 

使用分析物标准品和溶剂内标的校准曲线对番茄匀浆样品 中的所有化合物进行定量分析。用我们的方法和 QSight 质 谱检测器可以实现对不同氨基酸的良好色谱分离和灵敏度。 表 5 显示,对于所有氨基酸,均具有低 LOQ 和良好的线性 相关系数(>0.98)

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